1  前言

2  抑郁症动物模型的建立

  2.1  材料和方法

  2.2  结果

  2.3  小结及讨论

3  抑郁大鼠接受不同干预后的观察分析

  3.1  材料与方法

  3.2  结果

  3.3  小结及讨论

4  海马细胞凋亡测定及分析

  4.1  材料与方法

  4.2  结果

  4.3  小结及讨论

总结：研究创新和不足之处

附录一  常见检测凋亡的方法

附录二  本研究所用药物的药理学特征以及常见不良反应

附录三  研究中英汉缩略语名词对照

附录四  普通光镜下,Tunel染色的大鼠海马细胞图

1  前  言

抑郁症是临床常见的情感障碍,是一种以心境低落为核心症状的综合征。其临床表现多样，部分患者还具有反复发作或慢性迁延的特征，目前已经成为危害人类心理健康的重要要精神问题之一。在社会竞争日趋激烈的今天，抑郁症的发病率有上升趋势。据世界卫生组织发表的《2001年世界卫生报告》估计，抑郁症目前已成为世界第四大疾患,而到2020年则可能成为仅次于缺血性心脏病的第二大疾病。抑郁症已经成为家庭和社会的严重经济负担Malberg JE, Eisch AJ, Nestler EJ, et al.Chronic antide-pressant treatment increases neurogenesis in adult rat hippo-campus.J Neurosc.2000,（20）:9104-9110Blazer DG,Kessler RC,McGonagle KA,Swartz MS.The prevalence and distribution of major depression in a national community sample:the National Comorbidity Survey.Am J Psychiatry 1994,151:979-986Murray CJL,Lopez AD.Alternative projections of mortality and disability by cause 1990-2020.Global Burden of Disease Study.Lancet 1997,349: 1498-1504。

应激障碍和抑郁症患者涉及法律问题并不罕见Desrochers G,Bergeron S,Landry T,et al.Do psychosexual factors play a role in the etiology of provoked vestibulodynia? A critical review. J Sex Marital Ther. 2008 May-Jun;34(3):198-226 。有研究表明，在法医精神鉴定的案例中，有较多的暴力犯罪抑郁症患者。负性生活事件导致精神损伤、相应精神伤害评定，以及精神赔偿等问题也是目前法学和法医学研究的热点江明君，胡泽卿.抑郁症和躁狂症患者违法行为的犯罪学特征及对照分析.上海精神医学，2006（18）Z：401-403；410。结合大脑海马细胞损伤和心理解剖、常规法医解剖等方法来判断个体生前的精神状态，帮助进行死因推导，可以成为将来法医精神病学发展的一个方向。

关于抑郁症的发病机制至今不明，存在有诸多假说，例如单胺假说、受体假说、第二信使失衡假说等。这些假说虽然可以从不同的侧面对抑郁症的发生做出解释，但均不能全面彻底地阐明疾病的发生机制 Schildkraut JJ.The catecholamine hypothesis of affective disorders: a review of supporting evidence. Am J Psychiatry 1965，122: 509-22 Heninger GR, Delgado PL, Charney DS. The revised monoamine theory of depression: a modulatory role for monoamines, based on new findings from monoamine depletion experiments in humans. Pharmacopsychiatry 1996，29: 2-11 Duman RS, Malberg J, Thome J. Neural plasticity to stress and antidepressant treatment. Biol Psychiatry 1999，46: 1181-91，Duman RS, Heninger GR, Nestler EJ. A molecular and cellular theory of depression. Arch Gen Psychiatry 1997，54: 597-606。大量研究证实：抑郁症也是与应激密切相关的一类精神疾病。新近有研究发现，紧张的生活事件，尤其是慢性长期的压力与抑郁症，是一种剂量——反应关系。即不良的生活事件越多，抑郁症的发病率就越高Abel T, Nguyen PV, Barad M, Deuel TAS, Kandel ER, Bourtchouladze R. Genetic demonstration of a role for PKA in the late phase of LTP and in hippocampus-based long-term memory. Cell 1997，88: 615-26 赵幸福,徐一峰.生活事件和抑郁症[J].上海精神医学, 1995,7:209。目前发现，应激生活事件是抑郁症的明显促发因素并且认为慢性、低强度、长期的日常压力是引发抑郁症的主要原因。海马作为应激激素作用的靶区，是介导应激反应的主要中枢Stein-Behrens BA,Sapolsky RM.Stress axacebates neuron loss and cytoskeletal pathology in the hippocampus [J]. J Neurosci,1997,14:53-73。已有研究证实，海马神经元的凋亡、萎缩，海马神经祖细胞的增生调节，都参与了抑郁症的病理生理中严进,王春安,陈宜张,等.应激对大鼠行为和部分脑区谷氨酸含量的影响[J].心理学报,1995,27:422 Kempermann G. Regulation of adult hippocampal neurogene-sis-implications for novel theories of major depression. Bi-polar Disord, 2002, （4）: 17-33. 张黎明，李云峰，宫泽辉.神经元再生：抑郁症治疗的新策略.生理科学进展，2005，36（2）：109-113Impey S, Smith DM, Obrietan K, Donahue R, Wade C, Storm DR. Stimulation of cAMP response element (CRE)-mediated transcription during contextual learning. Nat Neurosci 1998，1: 595-601。通过研究海马来解释抑郁症的发病机制，以及抗抑郁药物起效机理，是一个很有前景的研究方向McEwen BS. Stress and hippocampal plasticity. Annu Rev Neurosci 1999( 22): 105-122  Sheline YI, Sanghavi M, Mintun MA, et al.Depression duration but not age predicts hippocampal volume loss in medically healthy women with recurrent major depression. J Neurosci 1999( 19):5034-5043Jessica E. Malberg Wyeth Research, Princeton, NJ Implications of adult hippocampal neurogenesis in antidepressant action  J Psychiatry Neurosci. 2004 May， 29(3): 196-205。

建立抑郁症的动物模型，是深入开展抑郁症与大脑功能、结构关系的一个重要基础Seligman ME, Beagly G.L earned helplessness in the rat [J].J Comp Physiol-Psychol, 1975,88(2):534。随着抑郁症应激理论的不断完善，相应的应激抑郁动物模型也得到发展。在动物身上制造抑郁疾病模型的方法很多。其中慢性应激模型其机理与人类抑郁症发病机理更接近，症状可持续相当长的时间，并且经过一定时间的抗抑郁剂治疗能使这些症状恢复正常。该模型与人类抑郁症发表与慢性应激有关的理论比较吻合 Willner P. Animal models of depression: an over view[J]. Pharma-col Ther, 1990, 45(3): 425 Willner P. Validity, reliability and utility of the chronic mild stress model of depression: a 10-year review and evaluation. Psychopharmacology, 1997( 134): 319-329许晶,李晓秋.慢性应激抑郁模型的建立及其评估.中国行为医学科学,2003,12(1):14-16 Willner P. The validity of animal models of depression .Psychopharmacology, 1984,83(1):1-16。使用慢性应激的方法建立抑郁动物模型在大量的科研中被采用。通过使用慢性应激诱导动物抑郁，使用抗抑郁症干预，可以进一步研究药物对抑郁症大鼠行为、对海马保护神经可塑性Kempermann G.Regulation of adult hippocampal neurogene-sis-implications for novel theories of major depression. Bi-polar Disord, 2002, 4: 17-33 Duman RS, Heninger GR, Nestler EJ. A molecular and cellular theory of depression. Arch Gen Psychiatry 1997( 54): 597-606，以及对脑内传导机制的影响，是目前运用较多的一个研究方向 Bliss TVP, Collingridge  G.A synaptic model of memory: long-term potentiation in the hippocampus. Nature 1993 (361): 31-9 Han EB, Stevens CI. Of  mice and memory. Learning Memory 1999(6): 539-541 Thoenen H.  Neurotrophins and neuronal  plasticity. Science 1995 (270): 593-8 Sheline YI, Wang P, Gado MH, Csernansky JG, Vannier MW. Hippocampal atrophy in recurrent major depression. Proc Natl Acad Sci USA 1996 (93): 3908-13。

现有的众多建立慢性应激抑郁模型的研究中，较少有人在使用过程中考虑到了大鼠性别以及居住模式对于研究结果的影响Beck KD, Luine VN. Sex differences in behavioral and neurochemical profiles after chronic stress: role of housing conditions. Physiol Behav. 2002，75(5):661-73 Yanhua Lin，Christel Westenbroek, Petra Bakker, Effects of Long-Term Stress and Recovery on the Prefrontal Cortex and Dentate Gyrus in Male and Female Rats. Oxford Journals Life Sciences Cerebral Cortex Cerebral Cortex Advance Access 10.1093/cercor/bhn035。治疗抑郁的药物有很多种，但是还很少有研究在同一个模型建立的基线水平上对常使用的精神类药物进行比较研究，不同的药物对于抑郁大鼠行为改善和海马细胞保护是否存在差异。通过探索这些问题，可以进一步了解性别在慢性应激导致抑郁症中的作用，也可以了解不同药物对于抑郁动物的不同效果。

新的神经生物学理论认为，成年哺乳动物海马等脑区神经元是可以由其祖细胞分裂而再生的。而抑郁症的发生与神经元再生障碍密切相关。在正常成年哺乳动物脑中，明显的神经元再生主要集中于嗅球系统和海马齿状回。海马作为学习、记忆以及引起情感障碍的关键脑区，每天有很多的新神经元产生Young EA, Haskett RF, Murphy-Weinberg V, et al. Loss of glucocorticoid fast feedback in depression. Arch Gen Psychiatry 1991 (48): 693。已有研究证明，海马神经元再生在抑郁症的发病机制和抗抑郁症治疗有效机理中扮演者重要的角色Impey S, Smith DM, Obrietan K, et al. Stimulation of cAMP response element (CRE)-mediated transcription during contextual learning. Nat Neurosci 1998，1: 595-601 McEwen BS. Stress and hippocampal plasticity. Annu Rev Neurosci 1999，22: 105-122Sheline YI, Sanghavi M, Mintun MA, Gado MH: Depression duration but not age predicts hippocampal volume loss in medically healthy women with recurrent major depression. J Neurosci 1999，19:5034-5043 ，是抑郁症发生和恢复的重要因素。研究发现，抗抑郁治疗可以增加海马神经元再生，通过上调海马神经元再生可能逆转或阻止应激对大脑、尤其是海马结构及功能的损伤Vaidya VA, Siuciak JA, Du F, et al. Mossy fiber sprouting and synaptic reorganization induced by chronic administration of electroconvulsive seizure: role of BDNF. Neuroscience 1999; 89: 157-62。因此，抑郁症作为一种神经退行性疾病，神经元再生无疑为其治疗靶标的选择提供了一个新的视角。而通过促进海马神经元再生，恢复应激对大脑结构及功能的破坏就成为未来抑郁症治疗领域的目标之一Reif A, Schmitt A, Fritzen S, Lesch KP Eur Arch Psychiatry Clin Neurosci 2007(257):290-299Feldmann RE Jr, Sawa A, Seidler GH. J Psychiatr Res 2007( 41):713-723。